C01 HPLC-MWD (Agilent Technologies)

หลักการ

เครื่องโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง

High Performance Liquid Chromatography (HPLC) ของ Agilent Technologies รุ่น 1220 Series

หลักการ

HPLC เป็นเครื่องมือใช้สำหรับแยกสารประกอบที่สนใจที่ผสมอยู่ในตัวอย่าง โดยกระบวนการแยกสารประกอบที่สนใจจะเกิดขึ้นระหว่างเฟส 2 เฟส คือ เฟสอยู่กับที่ (stationary phase) หรือ คอลัมน์ (column) กับเฟสเคลื่อนที่ (mobile phase) ซึ่งจะถูกแยกออกมาในเวลาที่ต่างกัน สารผสมที่อยู่ในตัวอย่างสามารถถูกแยกออกจากกันได้นั้นจะขึ้นอยู่กับความสามารถในการเข้ากันได้ดีของสารนั้นกับเฟสที่เคลื่อนที่หรือเฟสที่อยู่กับที่ โดยสารประกอบตัวใดที่สามารถเข้ากันได้ดีกับเฟสที่เคลื่อนที่ สารนั้นก็จะถูกแยกออกมาก่อน ส่วนสารที่เข้ากันได้ไม่ดีกับเฟสที่เคลื่อนที่ หรือเข้ากันได้ดีกับเฟสอยู่กับที่ ก็จะถูกแยกออกมาทีหลังโดยสารที่ถูกแยกออกมาได้นี้จะถูกตรวจวัดสัญญาณด้วยตัวตรวจวัดสัญญาณ (detector) และสัญญาณที่บันทึกได้จากตัวตรวจวัดจะมีลักษณะเป็นพีค ซึ่งจะเรียกว่า โครมาโตแกรม (chromatogram)

การวิเคราะห์

          HPLC สามารถตรวจวัดได้ทั้งเชิงคุณภาพวิเคราะห์ (Qualitative Analysis) และเชิงปริมาณวิเคราะห์ (Quantitative Analysis) โดยการเปรียบเทียบกับสารมาตรฐาน ส่วนใหญ่นิยมใช้วิเคราะห์สารประกอบที่ระเหยยาก (Low Volatile Substation) หรือมีน้ำหนักโมเลกุลสูง (High Molecular Weight Compounds) นอกจากนี้เทคนิค HPLC ได้ถูกนำมาใช้วิเคราะห์ตัวอย่างจากหลากหลายอุตสาหกรรม ทั้งด้านยา สิ่งแวดล้อม รวมถึงใช้มากในอุตสาหกรรมอาหาร เช่น การวิเคราะห์หาปริมาณวิตามิน สารปนเปื้อนในอาหาร สารพิษที่ผลิตจากเชื้อรา (Mycotoxin) ทั้งในด้านเพื่อการบริโภคภายในประเทศ และเพื่อการส่งออกไปจำหน่ายยังต่างประเทศ

ส่วนประกอบหลักของเครื่อง HPLC ประกอบด้วย

  • Mobile phase / Solvent (Reservoir): ตัวทำละลายที่ใช้ในการชะหรือแยกตัวอย่าง เป็นเฟสเคลื่อนที่มีลักษณะเป็นของเหลว ทำหน้าที่ในการนำสารตัวอย่างและตัวทำละลายเข้าสู่เฟสที่อยู่กับที่ที่บรรจุอยู่ในคอลัมน์ซึ่งกระบวนการแยกจะเกิดขึ้นภายในคอลัมน์
  • Pump: ทำหน้าที่ดึงตัวทำละลายซึ่งทำหน้าที่เป็นเฟสเคลื่อนที่เข้าสู่ระบบ HPLC
  • Injector: ทำหน้าที่ในการฉีดสารตัวอย่างเข้าระบบ HPLC
  • Column: ภายในบรรจุด้วยเฟสที่อยู่กับที่ มีลักษณะเป็นของแข็งหรือเจล ทำให้เกิดกระบวนการแยกองค์ประกอบของสารที่สนใจ โดยกระบวนการแยกเกิดขึ้นระหว่างเฟสที่เคลื่อนที่กับเฟสที่อยู่กับที่
  • Detector: เป็นตัวตรวจวัดสัญญาณ ทำหน้าที่ในการตรวจวัดสัญญาณของสารที่สนใจที่ได้จากกระบวนการแยก ซึ่งเครื่อง HPLC มี Detector คือ Multiple Wavelength Detector (MWD)

สถานที่ตั้ง

ห้อง 1301-7 ชั้น 3 อาคาร SC.01 คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น

เจ้าหน้าที่ผู้ดูแล/ติดต่อขอใช้บริการ

  • จิราภรณ์ พิมพ์ภูมี โทรศัพท์ : 0823235875 อีเมล : jirpim@kku.ac.th
  • อัตราค่าบริการ

    ชื่อรายการ อัตรา 1 อัตรา 2 อัตรา 3 หน่วย
    ค่าใช้บริการเครื่องมือ (ไม่ได้นำคอลัมน์มาเอง) 100 200 400 *ชั่วโมง
    ค่าใช้บริการเครื่องมือ (ไม่ได้นำคอลัมน์มาเอง) 600 1,200 2,400 *วัน
    ค่าใช้บริการเครื่องมือ (นำคอลัมน์มาเอง) 60 120 250 *ชั่วโมง
    ค่าใช้บริการเครื่องมือ (นำคอลัมน์มาเอง) 360 720 1,500 *วัน

    ปฏิทินการใช้งาน